绿弧菌已成对虾养殖拦路虎！2022对虾养殖如何高效防控？
对虾养殖中后期水温升高、投喂量很大，底质水质容易变差，弧菌极易在这种环境里大量繁殖，2021年弧菌病已导致沿海很多虾农损失惨重，部分产区虾农多次排苗、欲哭无泪。2022年，虾农如何防控弧菌？
作者：南京农业大学病理学博士 彭麟
金南农研究院 朱忠超
一、固体过氧化氢的细菌杀灭试验
1、菌悬液的制备
取各试验菌种的斜面第3代培养物，用无菌生理盐水洗下菌苔，移至另一无菌试管，适当稀释使菌含量为 1 × 107 ～ 5 × 107 CFU・mL-1，制成菌悬液备用。中和剂选择试验: 中和剂组方: 10 g・L-1硫代硫酸钠( A 组) ，10 g・L-1硫代硫酸钠 + 10 g・L -1吐温-80 ( B 组) ，10 g・L-1 硫代硫酸钠 + 10 g・L-1 吐温-80 + 10 g・L-1卵磷脂( C 组) ，20 g・L-1 硫代硫酸钠( D 组)，均以 PBS 缓冲液配制。以大肠杆菌为试验菌株，以 10.8 g・L-1过氧化氢消毒溶液为试药，设计 6 组：
1) 消毒剂+菌悬液;
2) 消毒剂+菌悬液)+中和剂;
3) 中和剂+菌悬液;
4) 消毒剂+中和剂)+菌悬液;
5) 菌悬液;
6) 培养基。
1.1试验结果判定标准：第 6 组无菌生长，第 4 组无菌生长或仅有少量菌落生长; 第 1 组有菌落生长，较 第 4 组为多，但较第 2、3、5 组为少; 第 2、3、5 组组间误差率不超过 15% 。如试验结果符合以上标准则表明 所选中和剂及其浓度适宜。试验重复 3 次。
1.2定量杀菌试验：设计 10.8 g・L-1、5.4 g・L-1和2.7 g・L-1 3 种质量浓度的 过氧化氢消毒药液。固体过氧化氢消毒液在使用时用无菌水配制。以无菌生理盐水作为阳性对照。取0.5 mL 菌悬液置于无菌试管内，加入 4.5 mL 试验浓度消毒液，立即混匀。分别作用至预设时间( 30 min、60 min、90 min 和 120 min) 后，各取0.5 mL 混合液加入到含4.5mL 中和剂的试管内，作用 30 min 后取 0.5mL 该液做活菌计数，计算杀菌率。试验重复 3 次。
结果处理:按如下公式计算各试验组的平均杀菌率( P) 
P = ∑( Noi － Nti )/ ∑Noi × 100%
式中：Noi为第 i 次试验消毒前或对照组活菌数; Nti为第 i 次试验消毒 t 时后或试验组活菌数。消毒效果评价标准: 对细菌和真菌的杀灭率不低于99.9% ，可判为消毒合格。
数据分析：采用 SPSS 17.0统计软件，对杀菌结果进行方差分析和 Duncan's 多重比较。
2、结果与分析
2.1固体过氧化氢杀菌效果观察
2.1.1中和剂选择：由表 1 可知，中和剂A组第 1 组无菌落生长，且第 2、3、5组间的菌落数误差率为 25.52% ，根据要求，第2、3、5组间的菌落数误差率须小于15% ，所以 A组不符合要求; B组第1组有少量菌落生长，第 4 组无菌落生长，但第 2、3、5 组间的菌落数误差率达到 22.75% ，不符合要求; C 组第1组和第4组菌落数符合要求，但第2、3、5组间的菌落数误差率为18.75% ,也不符合要求。D组第1、4 组菌落数符合要求，且第 2、3、5 组间的菌落数误差率( 3.78% ) 也符合规范要求。上述结果表明，含20 g・L-1硫代硫酸钠的 PBS 缓冲液作为中和剂，可有效中和10.8 g・L-1 过氧化氢消毒液的残留作用。
注: 1) A 组: 10 g・L-1硫代硫酸钠； B 组: 10 g・L-1硫代硫酸钠+10 g・L-1吐温-80；C 组: 10 g・L-1硫代硫酸钠+10 g・L-1吐温-80+10 g・L-1卵磷脂; D 组: 20 g・L-1硫代硫酸钠
2.1.2试验分组: 1.消毒剂+菌悬液; 2.(消毒剂 +菌悬液)+中和剂; 3.中和剂+菌悬液; 4.(消毒剂 +中和剂) +菌悬液; 5.菌悬液; 6.培养基
固体过氧化氢的杀菌效果：由表2可知，10.8g・L-1过氧化氢消毒液作用30 min，杀灭大肠杆菌效果可达到 99.99% ，消毒合格; 3 种浓度分别作用 60 min，杀菌效果均可达到 99.9% 以上，但10.8 g・L-1与另两种浓度相比，差异显著( P＜ 0. 05)  5.4g・L-1浓度组与2.7 g・L-1组相比，差异不显著( P＞0.05) 。可根据 需求选择不同的作用浓度和作用时间。10.8g・L-1 过氧化氢 消毒液与金黄色葡萄球菌作用 30 min 的杀菌率达到了99.92% ,5.4g・L-1浓度组相比差异不显著( P＞0.05)  10.8g・L-1及5.4 g・L-1 浓度组消毒液作用 90 min 时的效果与作用 60min 和 30 min 相比均存在显著性差异( P＜0.05) 。2.7g・L-1消毒液不同作用时间杀菌率差异显著( P＜0.05)。因此可根据不同需求选择不同作用浓度和时间。 3种浓度分别与副溶血弧菌作用 120 min，杀菌率均可达到 100% ，差异不显著( P＞0.05) 。
注: 同菌种同列不同小写字母表示差异显著( P＜0.05)  同行不同大写字母表示差异显著( P＜0.05) 。
通过固体过氧化氢对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和副溶血弧菌的杀菌试验，先进一步验证固体过氧化氢杀菌的有效性，同时为南美白对虾养殖致病菌的防控提供更坚实的数据，结合南美白对虾养殖一线分析，才能更好的对致病菌进行防控。
二、南美白对虾养殖弧菌感染的来源
1、水体本身存在
一般来说， 弧菌是天然水域自然存在的，属于厌氧菌。如果水体溶氧不足，“氧债”增加，就会给弧菌滋生提供了有利条件。
2、苗种自带
如果在亲虾时期，感染上了弧菌，弧菌可通过垂直方式感染至无节幼体中。苗体中自带的弧菌，具有破坏性大、传染性强、危害深远的特点。
三、弧菌的防控周期
1、前期（放苗后–30天）。此阶段苗体较小，以粉料及小粒径饲料为主，而对虾摄食量有限，产生的残饵多，导致水体中有机物会快速增加，弧菌会快速繁殖，尤其是体内弧菌的繁殖，破坏力更大，危害更严重。此阶段弧菌防控应为3-5天一次。
虾苗期弧菌较多，虾苗可以安全消毒杀菌吗？首先明确告诉大家， 苗期是可以消毒的，但是要选正确、安全、无刺激的消毒产品！
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2、中期（31–60天）。此阶段对虾个头变大，饲料投喂增加，饲料粒径在1.0左右，对虾处于快速生长期，对水体溶氧需求增大。如果溶氧不足，弧菌就会大量繁殖。此阶段弧菌防控应为5-7天一次。
3、后期（61–90天）。此阶段饲料投喂量大，易出现缺氧现象，导致弧菌爆发。此阶段弧菌防控为7-10天一次，推荐使用量为：过氧化氢粉250克/棚+过氧化氢颗粒500克/棚。
四、弧菌为什么爆发快
通过多年的跟踪分析，对于弧菌快速爆发原因，总结如下：
1、苗种自带的弧菌，危害很大，导致苗种死亡率更高；
2、底溶氧不足，弧菌繁殖加快；
3、水体有机物过多，水体耗氧量剧增，导致弧菌快速繁殖；
4、消毒类产品的不合理使用，导致水体微生态失衡，弧菌增加；
5、极端气候的出现，会导致弧菌防控难度增加。
水产养殖就是养水, 要进行南美白对虾的高效养殖和产出 , 其硬性条件是有利于南美白对虾健康生长的水质, 水体中的细菌微生物作为南美白对虾养殖中的动态因素，然而在追求高产为中心的养殖模式中，由于水体环境的恶化速度加快，致病菌快速大量的繁殖，导致南美白对虾很容易出现细菌感染，引发各类肝胰腺和肠道疾病，严重制约和影响了南美白对虾养殖的稳产和高产 。
小棚对虾养殖、工厂化对虾养殖以及高位池对虾养殖作为不同高密度养殖模式，对养殖环境和相关使用产品都有较高要求，尤其是在选用消毒类产品的时候，非常谨慎。而固体过氧化氢作为一款绿色环保第六代消毒剂，真正做到“无刺激、无残留、无余氯”，可全天候使用，不受条件限制，结束了常规消毒剂各种使用限制，像阴天、下雨、蜕壳期、气温变化大等制约因素，固体过氧化氢做到了百用无禁忌，防控弧菌、气单胞菌及病毒更超前。
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